By this author

Evaluation of the Possibility of Using the Registration of Fluorescence of Stained Cells Isolated from the Skin to Study the Severity of Oxidative Stress

Issue number 5 from 13.12.2025

Окислительный стресс является ключевым звеном в развитии многих патологических процессов. Для его оценки широко применяются флуоресцентные красители, чувствительные к активным формам кислорода, в частности дихлорфлуоресцени и его производные. Эти красители активно используются при работе с культурами клеток, однако данных об их применении для анализа клеток, выделенных непосредственно из тканей животных, крайне мало. В настоящем исследовании изучалась возможность использования 6-карбокси-2',7'-дихлорфлуоресцения для регистрации окислительного стресса в клетках, выделенных из кожных лоскутов крыс. Для индукции активных форм кислорода фрагменты кожи были инкубированы в среде с перекисью водорода, после чего из них готовили клеточные суспензии. Клетки окрашивали 6-карбокси-2',7'-дихлорфлуоресцением и Hoechst 33342, что позволяло нормировать флуоресцентный сигнал по числу клеток в пробе. В отдельных экспериментах предшественник 6-карбокси-2',7'-дихлорфлуоресцения вводился внутрикожно живым животным. Оценка соотношения флуоресценции 6-карбокси-2',7'-дихлорфлуоресцения и Hoechst 33342 показала возможность регистрации только выраженного окислительного стресса, в то время как различать его степень или фиксировать низкоинтенсивные изменения не удалось. Дополнительно микроскопический анализ выявил наличие клеточных агрегатов и фрагментов межклеточного матрикса, что снижало достоверность результатов. Полученные данные указывают на ограниченность метода окрашивания клеток кожи производимым дихлорфлуоресцения для оценки интенсивности окислительного стресса в нативной ткани.

25 0