Исследована стехиометрия взаимодействия цитохрома с с тетраолеоил-кардиолипином или тетрамиристоил-кардиолипином, компонентами цитохром с-фосфолипидных комплексов, играющих одну из главных ролей в апоптотических процессах. Исследование проведено с использованием флуоресцентно-меченого BODIPY фосфатидилхолина. Измеряли тушение флуоресценции зонда BODIPY-PC цитохромом с. Расчеты результатов тушения флуоресценции позволили определить стехиометрию образующихся комплексов цитохрома с с фосфолипидами. Для комплексов тетраолеоил-кардиолипина с цитохромом с стехиометрия составила 25 ± 7, а для комплексов тетрамирестоил-кардиолипина с цитохромом с – 7 ± 2. Полученные результаты могут свидетельствовать о различии в сродстве цитохрома с к насыщенным и ненасыщенным видам кардиолипина, несмотря на одинаковые электростатические характеристики молекул. Можно ожидать, что обнаруженные особенности взаимодействия цитохрома с с кардиолипином в итоге смогут определять интенсивность и направление апоптотических реакций.
Проведено сравнительное исследование свойств цитохрома с при его взаимодействии с фосфатидной кислотой и кардиолипином. Методом спектрофлуориметрии продемонстрированы сходные конформационные изменения в активном центре цитохрома с, которые происходят при его взаимодействии как с кардиолипином, так и с фосфатидной кислотой. С помощью люминол-зависимой хемилюминесценции подтверждено наличие близкой по величине пероксидазной активности у цитохрома с при его взаимодействии и с кардиолипином, и с фосфатидной кислотой, а применение метода ЭПР позволило при этом обнаружить образование феноксильного радикала этопозида в обоих комплексах. Можно сделать вывод, что и фосфатидная кислота, и кардиолипин эффективно изменяют структуру активного центра цитохрома с и способствуют увеличению его пероксидазной активности. Полученные результаты могут свидетельствовать о весьма вероятном участии как кардиолипина, так и фосфатидной кислоты в развитии опосредованных цитохромом с проапоптотических процессов в митохондриях.
Индексирование
Scopus
Crossref
Higher Attestation Commission
At the Ministry of Education and Science of the Russian Federation