С помощью атомно-силовой микроскопии, ИК-Фурье-спектроскопии, флуориметрического анализа с использованием красителя тиофлавина Т и рентгеновской дифракции изучены морфологические и структурные особенности коагрегатов двух мышечных белков саркомерного цитокскелета – титина и миозин-связывающего белка С (С-белка). Обнаружено, что в растворе, содержащем 30 мМ КСl, наблюдались структуры, напоминающие пленку с множественными разрывами, в то время как в растворе, содержащем 150 мМ КСl, исследуемые белки формировали сферические агрегаты. Полученные данные расширяют представления об особенностях агрегации саркомерных мышечных белков и важны для лучшего понимания их взаимодействия в саркомерах in vivo.
При патологиях, связанных с эксайтотоксичностью и нарушением кальциевого гомеостаза, нередко наблюдается гипервозбуждение нейронов, в том числе во время ишемического инсульта, гипераммониемии и нейродегенеративных заболеваниях. В случае долговременной устойчивой деполяризации эта гиперактивность нарушает множество процессов, в том числе энергетический баланс АТФ, и может вести к гибели клеток. Этим реакциям зачастую сопутствует продолжительное закисление цитозоля. Оно воздействует на активность большого количества зависимых от внутриклеточного рН ионных каналов, иных молекулярных объектов, которые регулируют концентрацию [Са] и других ионов в клетке, а также мембранный потенциал. Такие процессы могут дополнительно приводить к гипервозбуждению и нарушению ионного гомеостаза. Понимание связи [Са] и рН представляет интерес для развития подходов по устранению вышеописанных дисфункций. В частности, остается невыясненным, влечет ли коррекция Са-гомеостаза за собой нормализацию рН. В этой работе показано, что устранение проявлений гипервозбуждения, а именно, сверхвысокой частоты импульсов [Са] и повышенного уровня базального [Са] путем применения агониста дофаминовых D2-подобных рецепторов PD-168077 (10 мкМ) или агониста α2-адренергических рецепторов гуанфацина (10 мкМ) не приводит к заметной коррекции рН в гиппокампальных нейронах и астроцитах. Таким образом, для устранения последствий гипервозбуждения регуляция рН, является задачей отдельной, независимой от подходов по нормализации кальциевого гомеостаза.
Индексирование
Scopus
Crossref
Высшая аттестационная комиссия
При Министерстве образования и науки Российской Федерации