С помощью атомно-силовой микроскопии, ИК-Фурье-спектроскопии, флуориметрического анализа с использованием красителя тиофлавина Т и рентгеновской дифракции изучены морфологические и структурные особенности коагрегатов двух мышечных белков саркомерного цитокскелета – титина и миозин-связывающего белка С (С-белка). Обнаружено, что в растворе, содержащем 30 мМ КСl, наблюдались структуры, напоминающие пленку с множественными разрывами, в то время как в растворе, содержащем 150 мМ КСl, исследуемые белки формировали сферические агрегаты. Полученные данные расширяют представления об особенностях агрегации саркомерных мышечных белков и важны для лучшего понимания их взаимодействия в саркомерах in vivo.
При патологиях, связанных с эксайтотоксичностью и нарушением кальциевого гомеостаза, нередко наблюдается гипервозбуждение нейронов, в том числе во время ишемического инсульта, гипераммониемии и нейродегенеративных заболеваниях. В случае долговременной устойчивой деполяризации эта гиперактивность нарушает множество процессов, в том числе энергетический баланс АТФ, и может вести к гибели клеток. Этим реакциям зачастую сопутствует продолжительное закисление цитозоля. Оно воздействует на активность большого количества зависимых от внутриклеточного рН ионных каналов, иных молекулярных объектов, которые регулируют концентрацию [Са] и других ионов в клетке, а также мембранный потенциал. Такие процессы могут дополнительно приводить к гипервозбуждению и нарушению ионного гомеостаза. Понимание связи [Са] и рН представляет интерес для развития подходов по устранению вышеописанных дисфункций. В частности, остается невыясненным, влечет ли коррекция Са-гомеостаза за собой нормализацию рН. В этой работе показано, что устранение проявлений гипервозбуждения, а именно, сверхвысокой частоты импульсов [Са] и повышенного уровня базального [Са] путем применения агониста дофаминовых D2-подобных рецепторов PD-168077 (10 мкМ) или агониста α2-адренергических рецепторов гуанфацина (10 мкМ) не приводит к заметной коррекции рН в гиппокампальных нейронах и астроцитах. Таким образом, для устранения последствий гипервозбуждения регуляция рН, является задачей отдельной, независимой от подходов по нормализации кальциевого гомеостаза.
Indexing
Scopus
Crossref
Higher Attestation Commission
At the Ministry of Education and Science of the Russian Federation